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tris-甘氨酸如何配置电泳缓冲液?

Tris-甘氨酸电泳缓冲液:30.3gTris,188g甘氨酸,10gSDS

直接配置成 5X电泳缓冲液：15.1g Tris 94.0g Gly 5.0g SDS

变性电泳中为什么加甘氨酸

sds-page中样品液和浓缩胶选tris/hcl缓冲液，电极液选tris/甘氨酸，电泳开始后，hcl解离成氯离子，甘氨酸解离出少量的甘氨酸根离子。蛋白质带负电荷，因此一起向正极移动，其中氯离子最快，甘氨酸根离子最慢，蛋白居中。电泳开始时氯离子泳动率最大，超过蛋白，因此在后面形成低电导区，而电场强度与低电导区成反比，因而产生较高的电场强度，使蛋白和甘氨酸根离子迅速移动，形成以稳定的界面，使蛋白聚集在移动界面附近，浓缩成一中间层。

含8mol/尿素的tris―甘氨酸如何配置

1mol/l甘氨酸的配制方法方法如下：冰乙酸的浓度是17mol/L,假设要配置1000毫升1mol/L的醋酸，17*V=1*1000，V=58.8ml，将58.8毫升冰乙酸和941.2毫升水混匀即可。乙酸钾又称醋酸钾，分子式是C2H3KO2，分子量为98.1423，该品用作脱水剂、纤维处理剂和分析试剂。无色结晶或白色结晶性粉末。易吸湿。易溶于水和乙醇（1g产品溶于0.5ml冷水、0.2ml沸水、2.9ml乙醇）。水溶液对石蕊呈碱性反应。0.1mol/L水溶液的pH为9.7。相对密度1.57。熔点292℃。低毒，半数致死量（大鼠，经口）3250mg/kg，加热分解时其中间产物为草酸钾，最终产物为碳酸钾。

tris是什么试剂？

三羟甲基氨基甲烷试剂，三羟甲基氨基甲烷（Tris）是一种应用非常广泛的有机试剂，它的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间。它及其衍生物被广泛应用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的制备，可用于制作药物、有机合成、生物缓冲剂等。

其中在生化实验中，许多蛋白质及核酸相关的实验都需要用Tris作为生物缓冲剂。它甚至有超过磷酸盐缓冲液的趋势，因为它有好的缓冲能力、毒性低、对生物反应的干扰极低，而且纯度很高。有超过磷酸盐的趋势，如在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中都已开始实验TRIS缓冲液，很少再用磷酸盐。

TRIS（三羟甲基氨基甲烷）的应用

① 在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系稳定P值；

② 在凝胶中使用TRIS-HCL缓冲体系稳定PH值；

③ 被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂；

④ TRIS缓冲液的低离子强度特点还可用于线虫的中间纤维的形成；

⑤ 在TRIS盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”，可用于DNA的稳定和储存；

⑥ 将调节PH值的酸溶液换成乙酸，获得“TAE缓冲液”，换成硼酸可获得TBE缓冲液。这两种溶液常用于核酸电泳实中。