氨基酸的检验结果为什么有很大差别
复方氨基酸注射液的生产,主要存在二个问题,
一是澄明度,影响澄明度的关键是原料纯度,一般均需反复精制。
其次是稳定性,主要表现为含量下降色泽变深,其中以变色最为明显。
影响稳定性的因素有 氧气、光、温度、金属离子、pH等,故输液要通氮气,调节pH,加入抗氧剂等措施,并避免金属离子混入,避光保存。
一个配制批次,灭菌后的同一柜次,三个地方测出三种含量,主要成份是色氨酸最明显也就是说含量不均,上下差10几个标示量,偏高的现象还是多。
就色氨酸含量不均说一下我的看法:
1.活性炭的加入量必须精确。
2.加入活性炭后的搅拌时间必须保证30分钟以上,保证有足够的吸咐时间。
3.经常检查配制罐的充入氮气状态,有些氨基酸成份遇氧气分解氧化。
有些是秘密了不便全说,我想上述保证了问题就解决了
如何处理葡萄酒中氨基酸的检测结果
氨基酸检测最早是用氨基酸分析仪,不过早过时了,现在用HPLC的比较多,采用HPLC柱后衍生的方法,不过弊端太多,做初步的检测还可以,但做科研课题就不行了。最好的方法是用质谱技术。多达42种氨基酸的含量测定,采用质谱技术并使用44种氨基酸同位素对内标,精确度和重复性都有很好的保证,和传统的毛细管电泳法、HPLC法、氨基酸分析仪比较,无论是从精度上、还是检测的范围上和检测结果的准确度上都有了很大的提高和改善。
纸层析法分析氨基酸结果
氨基酸的分离鉴定——纸层析法
一,实验目的
掌握氨基酸纸层析的方法和原理,学会分析待
测样品的氨基酸成分.
二,实验原理
纸层析是以滤纸为惰性支持物的分配层析.滤纸纤维上的羟基具有亲水性,吸附一层水作为固定相,有机溶剂为流动相.当有机相流经固定相时,物质在两相间不断分配而得到分离.
溶质在滤纸上的移动速度用Rf值表示:
Rf=原点到层析斑点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离
在一定的条件下某种物质的Rf值是常数.Rf值的大小与物质的结构,性质,溶剂系统,层析滤纸的质量和层析温度等因素有关.本实验利用纸层析法分离氨基酸.
三,实验器材
(1)大烧杯(5000mL):1只/组
(2)微量注射器(100
L):1只/
组.
(3)喷雾器:公用.
(4)培养皿:1只/组.
(5)层析滤纸(长22cm,宽14cm的新华一号滤纸):1张/组.
(6)直尺,铅笔:自备.
(7)电吹风:1只/组.
(8)托盘,针,白线:1套/组.
(9)手套:1双/组.
(10)塑料薄膜:公用.
(11)小烧杯:50mL,1只/组.
四,实验试剂
(1)扩展剂:将4体积正丁醇和1体积冰醋酸放入分液漏斗中,与5体积水混合,充分振荡,静置后分层,弃去下层水层.
(2)氨基酸溶液:0.5%的已知氨基酸溶液3种(赖氨酸,苯丙氨酸,缬氨酸),0.5%的待测氨基酸液1种.
(3)显色剂:0.1%水合茚三酮正丁醇溶液.
实验试剂
五,实验操作
检查培养皿是否干燥,洁净;若否,将其洗净并置于干燥箱内120℃烘干.
(1)平衡:剪一大块塑料薄膜铺在桌面上,将层析缸或大烧杯到置于塑料薄膜上,再把盛有约20mL展层溶液的小烧杯置于倒置的层析缸或大烧杯中,用塑料薄膜密封起来,平衡20min.
(2)规划:带上手套,取宽约14cm,高约22cm的层析滤纸一张.在纸的下端距边缘2cm处轻轻用铅笔划一条平行于底边的直线A,在直线上做4个记号,记号之间间隔2cm,这就是原点的位置.另在距左边缘1cm处画一条平行于左边缘的直线B,在B线上以A,B两线的交点为原点标明刻度(以厘米为单位),参见左图.
(3)点样:用微量注射器分别取10mL左右的氨基酸样品(每取一个样之前都要用蒸馏水洗涤微量注射器,以免交叉污染),点在这四个位置上.挤一滴点一次,同一位置上需点2~3次,2~3mL/次,每点完一点,立刻用电吹风热风吹干后再点,以保证每点在纸上扩散的直径最大不超过3mm.每人须点4个样,其中3个是已知样,1个是待测样品.
(4)层析:用针,线将滤纸缝成筒状,纸的两侧
边缘不能接触且要保持平行,参见图3-3.向培养皿中加入扩展剂,使其液面高度达到1cm左右,将点好样的滤纸筒直立于培养皿中(点样的一端在下,扩展剂的液面在A线下约1cm),罩上大烧杯,仍用塑料薄膜密封.当扩展剂上升到A线时开始计时,每隔一定时间测定一下扩展剂上升的高度,填入表3-1中.当上升到15~18cm,取出滤纸,剪断连线,立即用铅笔描出溶剂前沿线,迅速用电吹风热风吹干.
(5)显色:用喷雾器在通风厨中向滤纸上均匀喷上0.1%茚三酮正丁醇溶液,然后立即用热风吹干,即可显出各层析斑点,参见左图.
(6)计算各种氨基酸的Rf值,并判断混合样品中都有哪些氨基酸,各人将自己的实验结果贴在实验报告上,见表3-2.
(7)以层析时间为横坐标,扩展剂上升高度为纵坐标画图,求出扩展剂上升到18cm时所需要的时间.
(8)将微量注射器内外用蒸馏水清洗干净,倒掉用过的展层液和平衡液,将培养皿洗净,整理好桌面上的仪器和试剂.
是否所有氨基酸黄色反应都呈阳性结果?是否大部分蛋白质呈阳性反映?为什么?
不是,黄色反应是对R基团上有特定的基团的氨基酸才呈阳性结果 有这些氨基酸的蛋白质呈阳性反映