tris-甘氨酸如何配置电泳缓冲液?
Tris-甘氨酸电泳缓冲液:30.3gTris,188g甘氨酸,10gSDS
直接配置成 5X电泳缓冲液:15.1g Tris 94.0g Gly 5.0g SDS
蛋白电泳为什么 tris glycine
Tris-Glycine,Tris-Tricine,Tris-硼酸盐都可以作为蛋白电泳的缓冲体系。
只要是可以稳定被检测样品的pH,并且不会和SDS反应或者发生相互作用的缓冲液都可以使用。
Tris-甘氨酸最常用,Tris-Tricine主要用在小分子蛋白(小肽)电泳中,Tris-硼酸盐一般用在糖蛋白电泳检测中。
变性电泳中为什么加甘氨酸
是说聚丙烯酰胺凝胶点用中的电泳缓冲液的作用吧~
电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而氯离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比,这一区带便形成了较高的电压梯度,压着蛋白质分子聚集到一起,浓缩为一狭窄的区带。当样品进入分离胶后,由于胶中pH的增加,呈碱性,甘氨酸大量解离,泳动速率增加,直接紧随氯离子之后,同时由于分离胶孔径的缩小,在电场的作用下,蛋白分子根据其固有的带电性和分子大小进行分离。
SDS电泳中浓缩胶里Tris-Hcl是什么作用
在sds-page不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是tris-hcl缓冲系统,浓缩胶是ph6.7,分离胶ph8.9;而电泳缓冲液使用的tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其ph环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而cl离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比,这一区带便形成了较高的电压剃度,压着蛋白质分子聚集到一起,浓缩为一狭窄的区带。当样品进入分离胶后,由于胶中ph的增加,呈碱性,甘氨酸大量解离,泳动速率增加,直接紧随氯离子之后,同时由于分离胶孔径的缩小,在电场的作用下,蛋白分子根据其固有的带电性和分子大小进行分离。