氨基酸分离 氨基酸分离方法及其原理

层析法分离氨基酸的原理是?

二、原理

纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分 配层析法,其中滤纸纤维上吸附的水是固定相 水是固定相,配层析法,其中滤纸纤维上吸附的水是固定相,展层用的有机溶剂是流动相 在层析时,有机溶剂是流动相.展层用的有机溶剂是流动相.在层析时,

将样品点在距滤纸一端约2～的某一处,将样品点在距滤纸一端约 3cm的某一处,的某一处 该点称为原点； 该点称为原点；然后在密闭容器中层析溶剂 沿滤纸的一个方向进行展层,沿滤纸的一个方向进行展层,这样混合氨基 酸在两相中不断分配.由于分配系数（ 酸在两相中不断分配.由于分配系数（Kd） 不同,结果它们分布在滤纸的不同位置上.不同,结果它们分布在滤纸的不同位置上.物质被分离后在纸层析图谱上的位置,物质被分离后在纸层析图谱上的位置,可用 比移值（ 来表示.比移值（Rf）来表示.所谓R 是指在纸层析中,所谓 f,是指在纸层析中,从原点至氨基酸 停留点（又称为层析点）中心的距离（ ） 停留点（又称为层析点）中心的距离（X）与 原点至溶剂前沿的距离（ ）的比值.原点至溶剂前沿的距离（Y）的比值.如图

原点到层析点中心的距离 X Rf = = Y 原点到溶剂前沿的距离

在一定条件下（如温度、展层剂的组成、 在一定条件下（如温度、展层剂的组成、 层析纸质量等不变）,某种物质的R ）,某种物质的 层析纸质量等不变）,某种物质的 f 值是常 因此可作为定性依据.数,因此可作为定性依据.由于氨基酸无色,由于氨基酸无色,可利用茚三酮反应使 氨基酸层析斑点显色,从而作定性分析.氨基酸层析斑点显色,从而作定性分析.本 实验利用纸层析法分离氨基酸.实验利用纸层析法分离氨基酸.

氨基酸解离步骤是什么?

氨基酸解离的过程如下：

两性离子溶于水时，其正负离子都能解离，但解离度与溶液的pH知有关，向该溶液中加入酸时，其两性离子的-COO-负离子在电场中向负极移动，加入碱性时，其两性离子的-NH3+正离子释放出质子，其自身成为负离子，在电场中向正极移动，这一过程称两性解离。

其原理是：所有氨基酸都含有碱性的氨基（或亚氨基）和酸性的羧基，因而能在酸性溶液中与质子结合而呈阳离子，也能在碱性溶液中与OH结合，失去质子而变成阴离子。

扩展资料：

氨基酸解离的两种常见形式：

1、盐析主要是利用不同蛋白质在不同浓度的中性盐溶液中的溶解度不同，向蛋白质溶液加入中性盐，破坏水化膜和电荷两个稳定因素，使蛋白质沉淀。

2、透析主要是利用仅有小分子化合物能通透半透膜，使大分子蛋白质与小分子化合物分离，达到除盐目的。凝胶过滤柱内填充带小孔的葡聚糖颗粒，可将蛋白质按分子量大小不同而分离。

参考资料来源：百度百科：氨基酸两性解离性

氨基酸的分离分析方法常有有哪些

如果是两个氨基酸的保留时间距离太近，那么只能调整液相条件了。

比如调整流动相比例，或者是梯度比例，把两个氨基酸拉开。

也可以适当调整衍生程序。

虽然衍生程序不会对氨基酸的保留时间有影响，不过会对它的信号产生影响。

如果这两种氨基酸的峰高有所下降，或许分离度也可以达到要求。

还有就是注意峰型。

衍生化程序很容易损坏色谱柱，超高效色谱的压力又高，色谱柱很容易损毁。

如果峰型不好，建议用纯乙腈低流速反冲色谱柱。

或者是更换新色谱柱。