enaa氨基酸 aa 氨基酸

β-葡聚糖酶纯化、性质及编码基因

10.2.2.1 β-葡聚糖酶的纯化和酶学性质

葡聚糖酶按照水解支链的类型分为a-葡聚糖酶或β-葡聚糖酶。a-葡聚糖酶或β-葡聚糖酶按照作用的糖苷键类型的不同，又可分为β（或a）-1，2葡聚糖酶，β（或a）-1，3葡聚糖酶，β（或a）-1，4葡聚糖酶和β（或a）-1，6葡聚糖酶。β-葡聚糖酶属于水解酶类，按照水解的作用方式（水解发生在胞外或是胞内）可以分为内切β-葡聚糖酶和外切β-葡聚糖酶两种类型。β-葡聚糖酶活性能力是根据水解最后的产物是单聚体还是二聚体而定义的。内切β-葡聚糖酶的活性通常比外切β-葡聚糖酶的活性要高一些，并且内切β-葡聚糖酶形成的低聚糖要多于外切β-葡聚糖酶。对β-葡聚糖酶尤其是β-1，3葡聚糖酶有较多的文献报道，β-1，6葡聚糖酶在微生物中很少被发现。大部分的外切葡聚糖酶表现有β-1，3葡聚糖酶和β-1，6葡聚糖酶的活性（Yamamoto et al.，1975；Vazquez de Aldana et al.，1991）。

木霉和粘帚霉的β-葡聚糖酶包括内切β-葡聚糖酶和外切β-葡聚糖酶。由于每种酶都有不同的成分、性质和Mr值，阻碍了这些酶之间的协同作用和调节作用（表10.2）。因为酶所含有的不同成分是来源于不同的菌株，所以不能确定这些不同的酶是不同基因的产物还是基因在翻译之后修饰的产物。因为产酶条件的不同，所以估算Mr值也有很多不同的方法。试验显示哈茨木霉CECT内切β-1，3葡聚糖酶与内切β-1，6葡聚糖酶的抗体与其他木霉菌株产生的β-葡聚糖酶会发生凝集作用（Rey et al.，2001），表明木霉中至少存在这两种酶。不同的β-葡聚糖酶编码基因的分离是确定木霉产生多少种β-葡聚糖酶的前提条件。

大部分研究采用色谱分析技术来提纯β-葡聚糖酶。Dubordieu等（1985）从哈茨木霉的商品化酶制剂中分离到两个外切β-1，3葡聚糖酶、1个内切β-1，6葡聚糖酶和1个β-葡聚糖酶单体。在这两个外切β-1，3葡聚糖酶中，一个酶的酶活性主要是由分子量大小为40kDa的蛋白构成的，此酶能降解灰霉病的β-1，3 葡聚糖和β-1，6葡聚糖。利用色谱分析法也从钩状木霉粗提物中分馏到了两种酶，一种是淀粉葡萄糖苷酶，无葡聚糖酶活性，一种是β-葡聚糖酶，没有淀粉葡萄糖苷酶活性。β-葡聚糖酶是由两个外切β-1，3葡聚糖酶和一个内切β-1，3葡聚糖酶组成的，它们的等电点pI分别为5.25，4.95和4.20（Thomas et al.，1983）。1977年，Bielecki和Galas从钩状木霉的另一个商品化制剂（名叫“Onozuka”）中分离纯化出两个β-1，3葡聚糖酶：一个是酸性但没有裂解细胞壁活性的水解海带多糖（β-1，3 葡聚糖），另一个对酿酒酵母有细胞壁裂解活性（Bielecki et al.，1977）。De Vies和Wessels（1973）从一株寄生在真菌中的绿色木霉里分离纯化出一种外切β-1，3葡聚糖酶，但是文章里仅仅描述了这个酶产生原生质体的能力。Tang-arone等（1989）比较了双孢菇糖提取物里长枝木霉产生的两种不同的β-葡聚糖酶。研究人员将从钩状木霉中分离的海带多糖稀释80倍后，发现其Km值低于担子菌细胞壁产生的β-葡聚糖酶的Km值，认为海带多糖中葡聚糖酶的作用影响器官的形成（Griffin，1994）。

近年来研究最多的是哈茨木霉CECT2413在真菌寄生物中产生的β-葡聚糖酶。大部分研究是采用等电法从哈茨木霉中分离一种基本同工酶和至少三种酸性同工酶（De la Cruz et al.，1995b）。通常说的β-1，3葡聚糖酶BGN13.1是以石耳多糖为介质采用吸附法纯化得到的纯物质。BGN13.1的分子量是78kDa且不能被糖化。这种酶在酿酒酵母细胞壁和海带多糖细胞壁中表现出最大的酶活性（海带多糖的Km值是3.3mg/mL）。这个酶属于内切β-1，3葡聚糖酶。BGN13.1 这个酶只对木霉具有专一性，因为抗血清反应表明：这个酶与从真菌和植物中提取的β-葡聚糖酶没有发生交叉反应。同样的，这个酶与从哈茨木霉中提取的β-1，3葡聚糖酶也不发生抗血清反应。哈茨木霉CECT2413至少产生两种内切 β-1，6 葡聚糖酶，纯化后大小分别为51kDa和43kDa（De la Cruz et al.，1995b）。还有研究将一些木霉（绿色木霉、长枝木霉、里氏木霉、康宁木霉、绿木霉）的培养物采用Western进行杂交，杂交结果表明这些木霉在相同条件下都产生BGN16.2（Rey et al.，2001）。

从哈茨木霉培养物上清液中发现的多种葡聚糖酶具有不同的催化活性、分子量和基因特性。但是对这些酶是由单基因调控还是由多基因调控目前仍不确定。Noronha等（1996）发现了另一株哈茨木霉在寄生真菌细胞壁或在几丁质平板上培养时均产生β-1，3葡聚糖酶。从这株哈茨木霉中纯化到一个酸性的内切β-1，3葡聚糖酶，分子量是36kDa，对海带多糖有水解活性。其他研究者描述哈茨木霉能产生两个分子量为32kDa和78kDa的外切β-1，3葡聚糖酶（Kitamoto et al.，1993；Lorito et al.，1994），也有人从一株里氏木霉（Bamforth，1980）中发现了一个外切β-1，3 葡聚糖酶，分子量为70kDa。从哈茨木霉和里氏木霉中发现的这些β-1，3葡聚糖酶大多是外切酶，水解通常发生在β-1，3位置，很少发生在β-1，6位置。从哈茨木霉CECT2413 中克隆到两个葡聚糖酶基因；一个是内切β-1，3葡聚糖酶，基因编码的蛋白质大小为78kDa（表10.2）；另一个是内切β-1，6葡聚糖酶，基因编码的蛋白质大小为43kDa。β-1，3葡聚糖酶基因的克隆表明了木霉菌株CECT2413主要具有β-1，3葡聚糖酶活性。该基因的克隆通过检测纯化蛋白的氨基酸序列得到。Southern杂交表明哈茨木霉β-1，3葡聚糖酶基因都是bgn13.1的单拷贝，哈茨木霉基因所编码的蛋白由728个氨基酸组成，优于N端的34个早前体氨基酸序列，该蛋白序列被一个KEX2肽酶分开，然后终止于KR（De la Cruz et al.，1995b）。在酵母里表达时，这个早前体氨基酸序列才被合成和分泌（Lora et al.，1995）。将早前体氨基酸序列和其他的β-葡聚糖酶进行氨基酸序列同源性比较，结果发现原先假定的活性部位能够识别谷氨酸。但是没有证据表明这个连接酶的分离同纤维素酶和葡聚糖酶一样。在烟草Ⅰ类几丁质酶中，带有半胱氨酸的N末端对几丁质的连接位点很重要，N末端的侧链是9～10 bp长度的非完全正向重复序列。以上表明这些区域来自一个普通的原始基因且是经过转化得到的（Shinshi et al.，1990）。通过放线菌的水平基因交换法明确了黄色粘球菌基因的结合位点和催化位点，这一方法被证明可行（Quillet，1995）。一些葡聚糖酶结合位点的转座源可以解释在一些菌中葡聚糖酶基因缺失的原因，例如木霉中β-葡聚糖酶基因的缺失。

将bgn13.1基因的序列与a或β-葡聚糖酶的基因序列进行同源性比较，结果发现同源性很低。因此确定这个基因编码的蛋白代表了一类新的β-1，3葡聚糖酶。来源于细菌、酵母、丝状真菌和植物的bgnl3.1线性序列的保守区域不同于其他来源的bgn13.1（De la Cruz et al.，1995b）。但是用玉米叶斑病的β-1，3葡聚糖酶基因就能检测到限制性同源性。这也可以从60余个葡聚糖酶基因的系统发育树上看出限制性同源性。从一些文献中也可以看出由 bgn13.1 形成的外群体和其他的 β-葡聚糖酶编码基因（Barnett et al.，1991）或β-1，6葡聚糖酶编码基因（De la Cruz et al.，1995b）在亲缘关系上比较远。但是由bgn13.1形成的外群体和木霉纤维素酶的亲缘关系比较近（表10.1）。

表10.2 从木霉中纯化的葡聚糖酶性质

注：a为mg/mL；b为μmol葡萄糖/（min.mg蛋白质）；ND为未描述；Gn为葡萄糖链的长度。

哈茨木霉CECT 2413的胰蛋白酶纯化后，根据其氨基酸序列设计兼并引物克隆了β-1，6葡聚糖酶的编码基因。相反的，对哈茨木霉bgn13.1基因，Southern 杂交分析的结果表明存在3个相同的基因拷贝（Lora et al.，1995）。蛋白序列分析表明来自酿酒酵母（Muthukumar et al.，1993；San Segundo et al.，1993）的EXG1（分布在耐热分生孢子里的外切β-1，3葡聚糖酶）和念珠菌的 SPR1（外切 β-1，3葡聚糖酶）有部分同源性（Chambers et al.，1993）。检测其蛋白序列的保守区域，发现外切葡聚糖酶催化区域的来源和内切β-葡聚糖酶的来源一样，且推测蛋白序列中含有糖基化基团。但是比较经En-doH处理后的蛋白Mr值和经 SDS-PAGE电泳后的蛋白迁移带值，发现从哈茨木霉CECT2413中纯化的第二个内切β-1，6葡聚糖酶内切肽序列几乎没有糖基化基团（De la Cruz et al.，1995a）。高雯等（2008）在哈茨木霉LTR-2中克隆出了内切β-1，3葡聚糖酶基因glu。该基因由2289个核苷酸残基组成，含有一个开放阅读框架，可以编码762个氨基酸，翻译后的氨基酸序列含有两个 β-1，3葡聚糖酶的保守区 RVVYIPPGTY和AASQNKVAYF。该基因与已发表的木霉β-1，3葡聚糖酶基因有较高的同源性，其中与哈茨木霉bgn3.1和绿木霉bgn13.1的同源性均达到93%以上。该序列已经提交GenBank，登录号为EF176582。表10.3列出了目前已克隆的木霉菌葡聚糖酶基因。

10.2.2.2 β-葡聚糖酶的调控和功能

和其他的一些丝状真菌一样（Griffin，1994），木霉和粘帚霉（De la Cruz et al.，1993）也是通过诱导和代谢产生β-葡聚糖酶。问题是像β-1，3葡聚糖这样的大分子是如何被催化和诱导的，答案仍然是未知的。人们根据生化和分子生物学方法对纤维素系统中酶的诱导和催化进行了推测，这两种方法一直认为是附着分生孢子的外切葡聚糖酶首先攻击了β-1，3葡聚糖分子（Kubicek et al.，1987 a；Kubicek et al.，1993）。菌丝体释放的二糖进一步促进了葡聚糖酶的生物合成。生长在不同碳源中的绿木霉或生长在寄主细胞壁中的粘绿木霉的培养基上清液中都有β-葡聚糖酶活性、几丁质酶活性、脂肪酶活性和蛋白酶活性。几丁质也能诱导长枝木霉（Tangarone et al.，1989）和玉米叶斑病菌（Schaeffer et al.，1994）产生β-1，3葡聚糖酶。

在自然界中真菌细胞壁中的几丁质酶和葡聚糖酶经常同时产生，同时诱导几丁质酶和葡聚糖酶的底物，而单个酶单独出现的情况并不多见（Lorito et al.，1994；表10.4）。酶对底物的相对活性是多种多样的，但是β-葡聚糖酶的最高活性是在寄主细胞壁中生长时产生的（Van Tilbura et al.，1993）。培养了8d的样品做SDS-PAGE电泳，分析电泳结果表明胞外蛋白的出现原因是诱导机制，蛋白的失活、降解和所检测到的酶活都是由于不同活性的酶在不同的作用时间诱导的结果（Van Tilbura et al.，1993）。在另外一些真菌中，酶失活的机理是由于内源蛋白的合成导致蛋白酶解和糖组成的转移（Friebi et al.，1975；Santos et al.，1978b）。不同的酶被不同的真菌细胞壁诱导后被发现和木霉的寄生能力相关（Sivan et al.，1989）。然而Ridout等（1986）发现生长在离体细胞壁中的蛋白属性不同于在植物病原真菌产生拮抗作用时产生的蛋白。

表10.3 已克隆的木霉菌葡聚糖酶基因

注：NCBI表示此行为从该网站获取数据。

表10.4 哈茨木霉CECT2413在不同碳源培养基上培养时产生的水解酶活性

注：C.W.为细胞壁；B.c为灰葡萄孢菌；P.c为马铃薯晚疫病；R.s为立枯丝核菌；T.h为哈茨木霉。

（De la Cruz，et al.，1993）

对一些重要的β-葡聚糖酶已经研究的很详细。De la Cruz等（1993，1995b）发现哈茨木酶CECT2413在不同的碳源上被几丁质、黑曲霉多糖（a-1，3和a-1，4葡聚糖）、石耳多糖（β-1，6葡聚糖）、真菌细胞壁、葡萄糖胁迫等条件诱导以后能产生外切β-1，3葡聚糖酶和外切β-1，6葡聚糖酶（表10.4）。无论是RNA干扰还是蛋白质合成抑制酶的诱导，都离不开酶合成中的表达和调控。在很多菌株中（长枝木霉、绿色木霉、康宁木霉、里氏木霉和粘绿木霉）观察到酶相似的表达和调控。在大多数情况下，当有2%葡萄糖存在的条件下一般能观察到β-葡聚糖酶的活性（Rey et al.，2001）（表10.5）。

表10.5 在不同碳源条件下木霉产生的β-1，6葡聚糖酶的活性

注：Bot.为灰霉；P.spp为青霉；P.c.为马铃薯晚疫病；S.c.为酿酒酵母；C.W.为细胞壁。

（Rey et al.，2001）

然而，当不同的β-葡聚糖酶同工酶被单独研究的时候就获得了一组不同的调控模式（De la Cruz et al.，1995b）。在几丁质、海带多糖、石耳多糖存在的条件下检测到四个同工酶，它们都是在真菌细胞壁胞外产生的内切β-1，3葡聚糖酶。BGN13.1的转录是由内切β-1，3葡聚糖酶基因编码得到，而并非葡萄糖胁迫产生。在有2%葡萄糖存在的条件下能检测到BGN13.1的活性（表10.6）。当在真菌细胞壁中生长时，虽然这个内切β-1，3葡聚糖酶单独存在时不能产生透明水解圈，但是它能阻止病原真菌和其他的水解酶相结合。因为这个内切β-1，3葡聚糖酶的特殊诱导作用和裂解活性，这个酶被认为是木霉对抗一些病原真菌的拮抗酶，然而它在腐生植物里的作用还没有被发现（De la Cruz et al.，1995b）。

表10.6 哈茨木霉CECT2413产生的两种β-葡聚糖酶和两种几丁质酶在不同底物条件下的不同调控作用

注：N 为northern杂交实验；W为western杂交实验；A为凝胶活性；R.s.为R.solani；S.c.为S.cerevisiae；C.W.为细胞壁；ND为未做。

（De la Cruz et al.，1995b；Gelgado et al.，2000；Gelgado et al.，2002）

在有葡萄糖存在的条件下，哈茨木霉CECT2413的内切β-1，6 葡聚糖酶编码基因可诱导细胞壁产生聚合物，从这个内切β-1，6葡聚糖酶的8000个基因里仅获得了一个cD-NA基因，且mRNA的翻译水平很低，说明该基因的表达很微弱（表10.6）。当内切β-1，6葡聚糖II浓度较高时（当浓度为25mg/mL时，抑制率为70%～80%），将它放在酵母细胞壁中培养，此酶能产生透明圈，而且这个酶能阻止其他真菌与其他裂解酶的结合（De la Cruz et al.，1995a）。

β-葡聚糖酶的调控规则如上所述，一些学者也研究了β-葡聚糖酶的构成。Del Rey等（1979）将绿木霉在葡萄糖培养基上培养，采用破壁提取法获得了β-1，3葡聚糖酶和β-1，6葡聚糖酶。如果不破除细胞壁，要么不能产生β-葡聚糖酶，要么就是β-1，6葡聚糖酶的产量很低。作者认为这种现象表明这些β-1，6 葡聚糖酶和形态基因有关。Kubicek（1982）也支持上述观点，他描述了拟康氏木霉和黄绿木霉β-1，3葡聚糖酶的构成。β-1，3葡聚糖酶的活性和培养基β-葡聚糖酶的释放量有关。这表明β-1，3葡聚糖酶的形成与β-葡萄糖和β-葡聚糖酶之间的转换有关。然而，在拟康氏木霉中和细胞壁结合的β-葡聚糖酶活性主要是由3种同工酶决定的，但是这三种酶的作用是相同的还是各不相同的至今尚不明确（Kubicek，1982）。在青霉菌中，与细胞壁结合的β-1，3葡聚糖酶Ⅱ和Ⅲ的作用是促进细胞壁的生长和延伸，而β-1，3葡聚糖酶I的作用是促进葡聚糖的流动和分生孢子的形成（Santos et al.，1978a，b）。综上所述，酶与细胞壁的结合对形态基因的建成并非是必需的。里氏木霉细胞壁和血浆膜的最外层是β-葡聚糖酶，但是它的作用是水解纤维素（Cummings et al.，1996）。

真菌的β-葡聚糖酶有各种不同的作用，包括营养（表10.7）和抑真菌作用。哈茨木霉P1产的78kDa的β-1，3葡聚糖酶有抑真菌活性，它能帮助内切几丁质酶和几丁质-β-1，4壳聚糖酶阻止灰霉病孢子的萌发和萌发管的延长。当蛋白质浓度是10～20μg/mL时能彻底地抑制病原菌的孢子萌发和萌发管的延长。Clarkson（1992）描述了哈茨木霉β-1，3葡聚糖酶的抑菌作用。另外，从绿木霉中分离的β-1，3葡聚糖酶和β-1，4葡聚糖酶能破坏真菌细胞壁的完整并导致细胞质渗漏（Jeffries et al.，1994）。

表10.7 不同的木霉和病原菌在双重培养基上对峙培养的β-1，3和β-1，6葡聚糖酶活性

注：+为致病菌培养1～4d过度生长或死亡；±为培养4～10d；-为培养10d后病原菌不生长或不死亡。

（Rey et al.，2001）

β-葡聚糖酶是木霉和粘帚霉细胞壁的组分之一，如同葡聚糖裂解酶的作用一样（De la Cruz et al.，1993，1995b）。目前仍不是很清楚它们的细胞壁是如何克服裂解酶的作用的。有一种解释认为是酵母成分对外界失活而造成的（Adans et al.，1993；Manocha et al.，1988）。细胞壁结构组分的出现抑制了裂解酶。例如，a-葡聚糖链的可折叠性质使它能抵制裂解酶（Kuhn et al.，1990）。其他成分例如结构蛋白也能起到保护作用。Goldman等（1994）和Vasseur等（1995）分离了3个基因编码的蛋白质，分子量大小分别为69kDa，37kDa和15.6kDa。假定15.6kDa蛋白的氨基酸序列在丝氨酸和丙氨酸的结构蛋白里也有，那么就证明该葡聚糖能够抑制水解酶。另外，黑色素的出现也为裂解酶提供了保护（Bull，1970）。

许多β-葡聚糖酶和真菌的自溶有关系。但是这些酶的重要作用还没有完全被弄清楚。例如在细胞壁组分更新中的作用、细胞在营养缺乏条件下的生存、与杀菌剂相互作用干扰细胞壁的合成等方面。一些丝状真菌在碳源受限的条件下形态基因发生改变，同时β-葡聚糖酶的一些裂解酶迅速增加都被认为是为β-葡聚糖酶提供能量。在一般的生长过程中，β-1，3葡聚糖酶和β-1，6葡聚糖酶在菌体自溶和细胞壁延伸时充当结构葡聚糖的角色（Santos et al.，1977，1978a，b）。

肠内营养时间

1、氨基酸型 ： ①平衡型:般营养型,商品名制剂肠内营养粉aa（维沃）；②疾病适用型:例苯丙氨酸代谢障碍适用等每袋80g内含100%游离氨基酸浓度约15%、脂肪2.5%（脂肪0.8g亚油酸0.6g）碳水化合物82.2%(61.7g麦芽糖糊精食物淀粉)同含体必需矿物质、种维素微量元素等属于渣粪便排量少需消化液或极少消化液便吸收能源自糊精及食物淀粉热量与氮比值128:1；脂肪自豆油其含量控制需要量低限减少胰腺外泌系统肠管泌刺激

适用于消化道通畅患者能进食合并-重度营养足；消化道术前准备；消化道手术吻合口瘘：咽部瘘、食管瘘、胃瘘、结肠瘘等；胰腺炎恢复期；短肠综合征患者（肠度短于60cm）；炎性肠道疾患：克罗恩病等

2.短肽型肠内营养（包括：乳剂、混悬液、粉剂）类制剂商品名肠内营养混悬液（sp）（百普力）、及粉剂类型（百普素）等所含蛋白质蛋白水解物肠运输低聚肽体系低聚肽经肠粘膜刷状缘肽酶水解进入血液容易机体利用同含乳糖避免乳糖耐受引起腹泻脂代谢障碍等系列问题几乎完全吸收低渣需少量消化液吸收排粪便量少适用于胃肠道功能或部胃肠道功能患者：胰腺炎；肠道炎性疾病；放射性肠炎化疗；肠瘘；短肠综合征；艾滋病病毒染等作营养足病手术前喂养及肠道准备能补充体理功能所需能量及营养

3．整蛋白型（剂型：乳剂、混悬液、粉剂）类制剂容易混淆要按照标准类仍容易理解

（1）平衡型普通整蛋白肠内营养：见商品名肠内营养制剂tp（安素）、肠内营养乳剂tp（瑞素）等该型制剂进入胃肠道刺激消化腺体泌消化液帮助消化、吸收体内消化吸收程同食物提供体必需营养物质能量需要其些制剂含链三酰甘油（瑞素）更利于脂肪代谢吸收；些制剂节约入液量制高能量密度每1ml提供1.3-1.5kcal能量（肠内营养乳剂（tp-he）（瑞高）肠内营养混悬液（tpf）（能全力1.5））些制剂添加膳食纤维改善胃肠道功能（肠内营养乳剂（tpf-d）（瑞代）能全力、瑞先等）同制剂产品特色同属于同类型要解其特殊处错类制剂适于面或颈部创伤或颅颈部手术；咀嚼吞咽功能性或神经性损害或咽困难；意识丧失病/或接受机械通气病；及高解代谢状态癌症、烧伤颅脑创伤病；神经性畏食等

（2）疾病适用型整蛋白肠内营养：糖尿病型肠内营养制剂（肠内营养乳剂（tpf-d）瑞代）、肿瘤适用型肠内营养乳剂（肠内营养乳剂（tpf-t）（瑞能））、高蛋白、高能量肠内营养乳剂（瑞高、瑞先）、免疫增强型肠内营养（茚沛）、肺病型肠内营养混悬液（易菲佳）、肾病用复a-酮酸类似物（同）等

二、en禁忌症及注意事项

en万能临床治疗些情况适合用en能应用于完全肠梗阻严重短肠综合征或高排泄量瘘半乳糖血症患者严重腹腔内染者禁用并且严格禁忌静脉内输入en

使用en应注意定期监测化指标使用前摇匀效期内使用药品应25℃密闭保存启冰箱内(2 – 10℃)保存并于24h内用完

三、早期应用en医发展趋势

患者食欲、饮食降应早期考虑给予肠内营养支持预防营养足并疾病康复定帮助

1、给药途径根据患者情况选择：口服、鼻饲、胃造瘘、空肠造口等

2、给药均通患者胃肠道耐受情况由少量逐渐增至患者需要量

3、喂养管材料选择目前首选聚氨酯导管较管柔软患者耐受性导管ph敏聚氯乙烯导管含增塑剂较硬、ph敏易现咽炎病耐受性使用间短硅胶材质导管柔软操作易置入另外管壁内粗糙故易发堵塞

总使用en治疗患者及家属应该定宣教使解en重要性掌握般护理知识效预防并发症发

什么是EN制剂营养基质

一、EN制剂类型与适应证

1、氨基酸型 分为： ①平衡型:一般营养型,商品名制剂有肠内营养粉AA（维沃）；②疾病适用型:例如苯丙氨酸代谢障碍适用等。每袋80g，内含100%的游离氨基酸浓度约15%、脂肪为2.5%（脂肪0.8g，亚油酸0.6g），碳水化合物为82.2%(61.7g为麦芽糖糊精，食物淀粉)，同时含有人体必需矿物质、多种维生素和微量元素等。属于无渣，粪便排出量少，因此不需消化液或极少消化液便可吸收。能源来自糊精及食物淀粉，热量与氮的比值为128:1；脂肪来自大豆油，其含量控制在需要量的最低限，以减少对胰腺外分泌系统和肠管分泌的刺激。

适用于消化道通畅的患者，不能正常进食，合并中-重度营养不足；消化道术前准备；消化道手术后吻合口瘘如：咽部瘘、食管瘘、胃瘘、结肠瘘等；胰腺炎的恢复期；短肠综合征的患者（小肠的长度短于60cm）；炎性肠道疾患如：克罗恩病等。

2.短肽型肠内营养（包括：乳剂、混悬液、粉剂）此类制剂商品名有肠内营养混悬液（SP）（百普力）、以及粉剂类型（百普素）等所含蛋白质为蛋白水解物，在小肠中也有运输低聚肽的体系，低聚肽经小肠粘膜刷状缘的肽酶水解后进入血液，容易被机体利用。同时不含乳糖，避免了乳糖不耐受引起的腹泻和脂代谢障碍等一系列问题。几乎完全吸收，低渣，需少量消化液吸收，排粪便量少。适用于有胃肠道功能或部分胃肠道功能的患者。如：胰腺炎；肠道炎性疾病；放射性肠炎和化疗；肠瘘；短肠综合征；艾滋病病毒感染等。也可作为营养不足病人的手术前后喂养及肠道准备。能补充人体日常生理功能所需的能量及营养成分。

3．整蛋白型（剂型有：乳剂、混悬液、粉剂），此类制剂最多也容易混淆，但是只要按照标准分类，仍然是容易理解的。

（1）平衡型普通整蛋白肠内营养：常见的商品名有肠内营养制剂TP（安素）、肠内营养乳剂TP（瑞素）等。该型制剂进入胃肠道后可刺激消化腺体分泌消化液，帮助消化、吸收，在体内消化吸收过程同正常食物，可提供人体必需的营养物质和能量的需要。其中有些制剂含有中链三酰甘油（如瑞素），更有利于脂肪的代谢吸收；有些制剂为了节约入液量而制成高能量密度，每1ml提供1.3-1.5Kcal的能量（如肠内营养乳剂（TP-HE）（瑞高），肠内营养混悬液（TPF）（能全力1.5））。还有些制剂添加了膳食纤维以改善胃肠道功能（如肠内营养乳剂（TPF-D）（瑞代），能全力、瑞先等）。不同的制剂因产品特色不一而同时属于不同类型，但只要了解其特殊之处就不会分错了。这一大类制剂适于面或颈部创伤，或颅颈部手术后；咀嚼和吞咽功能性或神经性损害，或咽下困难；意识丧失的病人和/或接受机械通气的病人；以及高分解代谢状态，如癌症、烧伤和颅脑创伤病人；神经性畏食等。

（2）疾病适用型整蛋白肠内营养：有糖尿病型肠内营养制剂（如肠内营养乳剂（TPF-D）瑞代）、肿瘤适用型肠内营养乳剂（如肠内营养乳剂（TPF-T）（瑞能））、高蛋白、高能量肠内营养乳剂（如瑞高、瑞先）、免疫增强型肠内营养（如茚沛）、肺病型肠内营养混悬液（如易菲佳）、肾病用复方a-酮酸类似物（如开同）等。

二、EN的禁忌症及注意事项

EN不是万能的，在临床治疗中有些情况是不适合用的。EN不能应用于完全肠梗阻，严重的短肠综合征或高排泄量的瘘。在半乳糖血症患者，严重腹腔内感染者也禁用。并且严格禁忌静脉内输入EN。

使用EN应注意定期监测生化指标，使用前摇匀，在有效期内使用。药品应在25℃以下密闭保存。开启后冰箱内(2 – 10℃)保存并于24h内用完。

三、早期应用EN是医学发展的趋势

当患者食欲、饮食下降时，应早期考虑给予肠内营养支持，可预防营养不足，并对疾病康复有一定帮助。

1、给药途径可根据患者的情况选择：分次口服、鼻饲、胃造瘘、空肠造口等。

2、给药方法均可通过患者胃肠道的耐受情况由少量逐渐增至患者的需要量。

3、喂养管的材料选择，目前首选聚氨酯的导管较多，此管柔软，患者耐受性好，导管对pH不敏感。聚氯乙烯的导管含增塑剂，较硬、对pH敏感，易出现咽炎，病人耐受性不好，使用时间短。硅胶材质的导管柔软，操作时不易置入，另外管壁内粗糙，故易发生堵塞。

总之，对使用EN治疗的患者及家属，应该定时宣教，使他们了解EN的重要性，掌握一般的护理知识，有效地预防并发症的发生。