怎样制作菌种母种，菌种如何脱毒

　　回答1、常用配方：去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂10-20g、水1000ml。2、制作方法：将马铃薯去皮洗净，切成小块煮至熟而不烂，过滤加水至1000ml；将琼脂剪成小段，放入锅内，边搅边煮，溶化后加入葡萄糖；装管前取一小勺浮在凉水中冷却观察其硬度适合然后分袋试管，用棉花塞塞住试管口，进行灭菌；采用组织分离法，通常是从食用菌子实体内部分离纯菌种；经过10天左右菌丝长满瓶，母种即制作成功。

　　一、怎样制作菌种母种

　　1、母种，又称为一级种，用直径18-22cm的试管制备。常用配方：去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂10-20g、水1000ml。

　　2、制作方法：

　　（1）将马铃薯挖去虫眼，去皮洗净，切成小块煮至熟而不烂，过滤加水至1000ml。

　　（2）将琼脂剪成小段，放入锅内，边搅边煮，待琼脂溶化后加入葡萄糖。

　　（3）由于琼脂品质各有不同加入份量要根据实际情况而定，装管前取一小勺浮在凉水中冷却观察其硬度适合然后分袋试管，用棉花塞塞住试管口，放入小高压锅内灭菌，当压力表达到1.5个压力时，再灭菌30分钟。让其自然冷却，取出放置在接种箱中备用。

　　（4）采用组织分离法，通常是从食用菌子实体内部分离纯菌种，操作时，从子实体内切取一小块组织，放在培养基中培养可长出纯菌种，且菌丝萌发快，遗传性状稳定，后代不易发生变异。

　　（5）取出试管放成斜面，放置2-3天后，无杂菌感染再放入接种箱内接种，接了种的试管放入培养室内进行培养，温度要求25℃左右，相对湿度75%以下。发现污染及时挑出，经过10天左右菌丝长满瓶，母种即制作成功。

　　二、菌种如何脱毒

　　1、菌种的脱毒，一般可借鉴植物的脱毒技术。所谓植物脱毒，是将植物茎尖生长尖端组织进行分离，将分离组织置于特定培养基中进行培养，从而获得脱离原体病毒、病菌的新生种苗。具体的脱毒方法有菌丝尖端脱毒法、原基组织脱毒法等。脱毒菌种恢复了菌种原有的生物特性，使菌种的抗性得到了增强，抗病力得到了提高。

　　2、菌丝尖端脱毒法，一般使用规格为90mm或110mm的培养皿，无此规格培养皿时，可改用规格为25mm*200mm的大型试管，但操作不太方便。原基组织脱毒技术，最大程度革除了原有组织分离时子实体处于生长中后期携带病毒、病菌可能性极大等弊端，真正实现了分离尖端组织脱毒的目的。